قیمت 120,000 تومان

زبان: فارسی
27 , 28 شهریور ساعت 9 الی 13
حضوری
ساعت 9 الی 13
سطح مطالعه: پیشرفته
همراه با ارائه گواهی معتبر
دکتر فاطمه کیفی
دکتر فاطمه کیفی
مدیر گروه علوم آزمایشگاهی
نمایش پروفایل
درباره مدرس

دکترای تخصصی بیوشیمی بالینی


از این مدرس
دکتر حسین جاوید
دکتر حسین جاوید
دکترای تخصصی بیوشیمی بالینی
نمایش پروفایل
درباره مدرس


از این مدرس

SDS- PAGE و Western Blot

SDS- PAGE و Western Blot وسترن بلات (که گاهی اوقات Protein Immunoblot نیز نامیده می شود)، به طور گسترده در رشته هایی مانند ایمونوژنتیک، بیولوژی مولکولی و سایر رشته های مولکولی استفاده می شود. از این تکنیک در جهت شناسایی پروتئین های بافت و نمونه های سلولی استفاده می شود.به طور خلاصه، پس از دناتوره شدن پروتئین ها در نمونه، پروتئین ها بر روی ژل الکتروفورز قرار می گیرند. پس از آن آنتی بادی های اولیه برای اتصال اختصاصی به پروتئین ها اضافه می شود. پس از اضافه شدن آنتی بادی اولیه و شست شدن غشای الکتروفورز، آنتی بادی ثانویه کونژوگه به غشاء اضافه می شود. آنتی بادی ثانویه به دلیل اضافه شدن مولکول های کروموژن، رادیواکتیویته و یا .. که قابل شناسایی و ردگیری هستند، پروتئین های اختصاصی به صورت غیر مستقیم ردیابی می شوند.

نام وسترن بلات مشتق شده از نام تکنیک Southern Blot می باشد که برای شناسایی مولکول های DNA مورد استفاده قرار می‌گیرد و توسط Edwin Southern ابداع  شد. همچنین به تکنیک شناسایی مولکول های RNA نیز نام Northern Blot  اطلاق شد. نام وسترن بلات توسط W. Neal Burnette به این تکنیک داده شد.

کاربردهای SDS- PAGE و Western Blot:

وسترن بلات به طور گسترده در بیوشیمی کاربرد دارد، و برای تشخیص کیفی پروتئین ها و همچنین تغییرات پروتئینی مورد استفاده قرار می گیرد. این روش برای تشخیص اختصاصی حضور یا عدم حضور پروتئینی خاص در یک ترکیب مورد استفاده قرار می گیرد. همچنین از طریق سایز و شدت رنگ شکل گرفته بر روی غشای بلات می توان ارزیابی نیمه کیفی از پروتئین مورد نظر داشت. همچنین تهیه ی رقت سریالی از پروتئین خالصی که غلظت های آن را می دانیم می تواند در تعیین غلظت دقیق‌تر به کار آید.

وسترن بلات همچنین برای تأیید پروتئین تولید شده پس از کلونینگ مورد استفاده قرار می گیرد.

در تشخیص و آزمایشگاه

  • تأیید حضور ویروس HIV
  • تشخیص BSE یا همان بیماری جنون گاوی
  • تشخیص تولارمی (تب خرگوش) که به دلیل باکتری فرانسیسلاتولرانسیس ایجاد می شود.
  • برخی از اشکال بیماری لایم (Lyme)
  • تأییدیه ی هپاتیت B
  • تأییدیه ی هرپس ویروس-2 (HSV-2)

با شرکت در  کارگاه  SDS- PAGE و Western Blot میتوانید یکی از روش های پر کاربرد در جداسازی و شناسایی پروتئین های خاص از مخلوط پروتئین های موجود در محیط های سلولی را به صورت عملی انجام دهید و از نتایج آن برای کار در آزمایشگاه های تشخیص طبی، مراکز تحقیقاتی و در پایان نامه های ارشد و دکترای گرایش های مختلف استفاده نمایید.

آنچه در این کارگاه خواهید آموخت:

  • اصول و کاربردهای الکتروفورز پروتئین SDS-PAGE
  • انجام عملی ساخت ژل SDS-PAGE
  • تزریق نمونه سرم در ژل SDS-PAGE
  • معرفی اصول و مبانی وسترن بلات
  • انتخاب غشای مناسب و چگونگی آماده سازی آن برای وسترن بلات
  • انجام عملی تکنیک وسترن بلات
  • تفسیر نتایج حاصل از وسترن بلاتینگ

پیش نیاز های این دوره آموزشی

ترجیحا دانشجویان ترم های آخر مقاطع کارشناسی
دانشجویان کارشناسی ارشد و دکترای گرایش های مختلف علوم آزمایشگاهی

نظرات